第四节　技术特点

一、单个细胞检测

流式细胞术最具特色的方法学特点就是它的分析对象为单个细胞或单个颗粒样物质，因此它是一种单细胞（或颗粒）分析方法。通过对一个一个的单个细胞（或颗粒）的测定，获得关于细胞群（或颗粒群）整体的相关信息，如细胞群全体细胞的平均大小、胞质颗粒结构的多少、某种或某几种抗原成分的平均含量，以及各种指标的分布范围等资料。

二、定量检测

流式细胞术虽然不能完全取代显微镜镜检技术，却是对显微镜镜检技术的强大补充，使显微镜镜检这种纯形态学检查方法中不能或难于定量的检验内容定量化，排除了人为因素带来的主客观误差，弥补了形态学检查结果以“描述”容易带来的理解上的偏差，为临床病情判断、疗效监测等提供了计量资料依据。

三、快速

流式细胞术对单个细胞（或颗粒）的定量分析具有快速特点，每秒可以对数百甚至数千的细胞（或颗粒）进行测定。单位时间内测定的细胞（或颗粒）数量少，采集时间长；相反，单位时间内测定的细胞（或颗粒）数量多，采集时间短。考虑到检验结果的准确性、测定效率及仪器的响应能力等方面可能存在的问题，一般将实际采集速度控制在每秒200～500个细胞（或颗粒）为宜，单份样品采集时间在30～60秒，采集细胞（或颗粒）总数在10 000个以上，特殊情况下要求最少不低于5 000个细胞（或颗粒）。即便如此，流式细胞学检验技术的测定速度，也是人工显微镜镜检所望尘莫及的。

四、准确

流式细胞术具有准确性高的特点，这种准确性建立在对大量细胞（或颗粒）信息的定量化采集基础之上，仪器内置软件对这些来自大量单个细胞（或颗粒）的定量化原始计量资料，进行自动的统计学处理，计算出每一种计量资料的平均值、分布宽度，客观地反映了设门时圈定待分析细胞群（或颗粒群）的相关信息。

五、特异

流式细胞术测定蛋白质成分以抗原抗体特异性结合反应为基础，使用的抗体均为荧光标记的特异性单克隆抗体，并且在实际测定过程中，使用与特异性抗体相同性质的同型对照抗体为阴性对照，确保了方法学上的特异可靠。

六、重复性

流式细胞术以流式细胞仪为细胞相关计量资料的采集设备，排除了人为主客观因素对检验结果的影响。同时，在样品上机采集前，仪器的光路、流路均经过校正，采集细胞（或颗粒）的数量大，结果是大量细胞（或颗粒）相关信息的统计学处理值，因此其重复性得到了充分保障。

七、多参数检测

流式细胞仪采集的光学指标包括散射光和荧光两种。散射光包括反映细胞大小的FS和反映细胞质内颗粒性结构的SS。荧光的种类根据仪器内置荧光采集通道的数量而定，常见型号的临床流式细胞仪一般具有4～5个荧光通道，因此可以同时对同一个细胞上发出的4～5种不同的荧光信号进行采集与测定。因此，每份样品上机测定后，可以得到FS、SS、4～5种荧光参数值，满足关于细胞大小、细胞内部结构、细胞表面或内部4～5种不同蛋白质成分的表达量的计量信息。

流式细胞术具有的这种多参数分析的优点，不仅是检测效率上的优势，更重要的是可以用其中的1～3种荧光信息作为待分析靶细胞的筛选标志，从一群单纯依靠细胞大小和/或细胞内部结构无法区分待测靶细胞的情况下，将待分析的靶细胞区分出来，从而达到对靶细胞的细胞大小、细胞内部结构、某种或几种蛋白质表达的分析，尤其是蛋白质表达的分析，在临床疾病的诊断与鉴别、病情监测、疗效判断、预后评估中都具有广泛的应用前景。